肉毒素作用原理是抑制神經沖動，傳遞到表情肌，表情肌不能收縮，處于遲緩、失張力的狀態，皺紋就不會產生或者肌肉處于局部癱瘓的狀態，從而達到除皺、瘦臉的目的。藥品說明書上明確指出，肉毒素起作用的時間是1-7天，但會因人而異，快的求美者第2天就能感覺到皺紋減輕，而部分求美者可能會7天，甚至于14天才感覺到這種變化。根據醫生經驗，一般肉毒素3天開始起效，7天就非常明確，偶爾有部分求美者14天效果還是不明顯，可以繼續地觀察一段時間。通常很少有求美者能夠對抗肉毒桿菌毒素的作用，都會起到作用，只是作用強和弱、起效快和慢的問題。