性激素六項并無具體限制期限，通常需要根據檢查目的進行判斷。性激素六項測量的是在下丘腦-垂體-卵巢軸調節下的各個激素水平之間的相關性，包括雌激素、孕激素、卵泡刺激素、黃體生成素、睪酮、泌乳素六種。通常是在月經出現問題或備孕時進行激素六項檢查，因此若一次檢查便能作出明顯診斷，則并不需要進行后續檢查，可以直接開始相應治療。若發現泌乳素水平出現異常升高，結合垂體蝶鞍區的核磁檢查，便可以發現垂體瘤、泌乳素瘤，這時可以直接進行溴隱亭治療，后期定期檢測相應指標即可。若一次檢查并不能明確結果，可能需要動態觀察，這個過程中有可能會隨著卵泡的生長發育及破裂，出現雌激素上升情況，還會隨著卵巢黃體形成，出現孕激素上升。因此需要在一個月經周期內，進行兩次甚至多次激素六項檢查。