成人肺炎支原體感染情況相對較少，一般兒童肺感染炎支原體比較多，檢查方法為血清學檢測。如果出現血清支原體抗體升高，而且觀察滴度有變化趨勢，對臨床診斷有一定幫助；影像檢查，如胸片或者胸部CT顯示存在支原體感染征象，因為支原體感染相對于其它病原體感染存在胸部影像特征。 血清學檢測如果是陰性、胸部影像存在感染征象時，要給予經驗抗感染治療。如果胸部影像吸收較好，可對診斷進行佐證。檢查方法最常見血清學和影像學，氣道分泌物檢測培養尚無法診斷。如果分布影像存在異常，懷疑為支原體感染，可以使用氣管鏡，在氣管鏡下使用現代分子生物學診斷方法，如mNGS等高精尖檢測方法。