梅毒檢查包括蒼白螺旋體、暗視野鏡下檢查，梅毒血清學試驗檢查以及腦脊液試驗檢查。其中腦脊液檢查主要用于神經性梅毒的診斷，如果患者出現相關神經癥狀或經過治療無效者，應進行腦脊液檢查，包括白細胞計數、蛋白定量、多聚酶鏈反應。病情活動時腦脊液白細胞計數通常增高，因此腦脊液白細胞計數常作為判斷療效的敏感指標。梅毒的檢查也可在暗視野顯微鏡下，通過對患者可疑皮損如硬下疳、扁平濕疣處的分泌物進行檢查，可作為確診早期梅毒的依據。而梅毒血清學試驗方法較多，如可進行快速血漿反應素環狀卡片試驗，或梅毒螺旋體顆粒凝集試驗，特異性較強，可用于梅毒患者感染梅毒螺旋體的確診手段。