強直性脊柱炎的確診是通過臨床癥狀以及影像學檢查進行確診，臨床癥狀主要是下腰背的疼痛，病程比較長，超過3個月，疼痛以晨僵為主要特征，即通常夜間比較疼，尤其是凌晨時分比較明顯，起床以后活動，疼痛能夠得到緩解，假如平時白天坐的時間太長，也會出現明顯的疼痛。另外，如果出現疼痛，活動以后會得到緩解，休息反而會加重。強直性脊柱炎的確診需要有影像學檢查，影像學檢查X光、CT、核磁都可以，會出現骶髂關節的間隙變窄以及關節面的模糊、關節的強直、融合等。還可以進行血清學的檢查，也就是HLA-B27的檢查，如果是陽性，基本上可以確診為強直性脊柱炎，所以強直性脊柱炎的診斷，以臨床癥狀和影像學檢查作為診斷依據，B27作為加強的預計。假如B27陽性加上有臨床癥狀，可以診斷為強直性脊柱炎，假如B27陰性，但是有明確的臨床癥狀以及影像學檢查，也可以診斷是強直性脊柱炎。