硝酸甘油的作用較多，屬于血管平滑肌松弛藥物。如果血管平滑肌存在于靜脈系統，則硝酸甘油可以舒張靜脈系統，減少心臟回心血量，減輕心臟負擔，從而緩解心臟做功。如果硝酸甘油擴張動脈血管，會減少心臟泵出血液的壓力，也會減少心臟做功。 以上兩點用于糾正心力衰竭，硝酸甘油起到緩解心臟壓力作用。硝酸甘油還有一個非常重要的作用，就是擴張冠狀動脈血管，對于冠狀動脈狹窄，也就是心絞痛患者服用硝酸甘油，可以擴張冠狀動脈血管，從而減輕心肌缺血的表現，緩解心絞痛癥狀。