睪丸穿刺取精做試管的成功率也比較高，從睪丸穿刺取精，適用于梗阻性無精子癥的患者，精液中沒有精子，或者是沒有輸精管道，需要從睪丸來取精，獲得精子來進行試管嬰兒，這種情況做的是二代試管嬰兒，也稱為單精子注射。有些生殖中心的醫生，喜歡從睪丸取精去做試管，因為認為睪丸的精子，沒有這種氧化應激的反應，精子的活性或者質量會更好。而有一些醫院的醫生，可能喜歡從附睪取精。因為附睪精子的活性可能會好一些，睪丸從產生精子以后，要進入到附睪獲得能量，使精子具有活性。所以有些醫生認為，附睪的精子活力更好，當然這跟每個生殖中心的經驗有關系。如果從附睪能取得精子，做試管也沒有問題，但是有些病人可能附睪傳不到精子，比如說附睪梗阻，或者是附睪發育不良等患者，附睪也許取不到精子，必須要從睪丸去取，所以生殖中心應該要具備，對于睪丸精子、附睪精子都能夠可以去做試管嬰兒的能力。理論上來說，從睪丸穿刺取得精子和附睪穿刺取得精子，做試管的成功率應該相當，因為有些人可能沒有辦法，從附睪穿刺取精，只能從睪丸穿刺取精。