強直性脊柱炎應根據臨床癥狀、體征和輔助檢查進行確診。臨床癥狀表現為超過3個月的持續性下腰痛，胸椎和腰椎活動度較正常人有所減退。早期強直性脊柱炎可以骶髂關節X線片或骶髂關節CT檢查作為輔助檢查，發現骶髂關節面增生、硬化，甚至關節間隙變窄，提示強直性脊柱炎可能。血液方面可對患者進行血沉、C反應蛋白、血常規及HLA-B27檢測，進行綜合判斷。