25-羥維生素D是監測血液中維生素D的水平，雙羥的維生素D濃度在體內非常不恒定，半衰期非常短，很難反映血中維生素D的濃度。而25-羥維生素D的濃度在血液中比較恒定，通過監測25-羥維生素D的水平可以充分反映血液中D的水平是否恒定、是否存在維生素D的缺乏。25-羥維生素D的正常值不低于30ng/L，當25-羥維生素D<20ng/L時，認為是維生素D缺乏；而當25-羥維生素D<10ng/L時，認為是25-羥維生素D存在嚴重缺乏。沒有經過非常好的補充時，大多數人維生素D處于缺乏狀態。而經過系統、規范地補充維生素D，使25-羥維生素D的濃度維持在30ng/L左右，則屬于相對比較正常的狀態。