蛛網膜是腦或脊髓的第二層被膜。腦和脊髓都有三層被膜，對于腦的被膜，第一層是硬腦膜，包括大腦鐮、小腦幕和上矢狀竇等靜脈竇；第二層是蛛網膜；第三層是軟腦膜，所以蛛網膜是大腦的第二層被膜。對于脊髓，第一層被膜是硬脊膜；第二層是蛛網膜；第三層是軟脊膜。所以蛛網膜對于腦和脊髓，都是第二層被膜。蛛網膜沒有血管和神經，但蛛網膜與軟腦膜和軟脊膜間有很重要的結構，即腦脊液，又稱為蛛網膜下腔。蛛網膜下腔在腦和脊髓的表面都有腦脊液流動，對腦和脊髓起到一種營養、支持和緩沖的作用。當發生某些疾病時，比如腦蛛網膜下腔出血，或者腦、脊髓感染，神經根病變，都可以穿刺蛛網膜下腔，留取腦脊液，進行常規和生化等方面的檢查，分析腦脊液的成分，有助于對腦和脊髓的疾病進行判斷和評估。